13-1刑事化學

13-1刑事化學
刑事化學是應用化學原理和技術來解決刑事司法問題的科學領域。它不僅僅是化學的應用，更是一門結合了化學、生物學、物理學與法醫學的跨學科專業。在犯罪現場的證據收集、分析和解釋中，刑事化學扮演著至關重要的角色，旨在提供客觀且高度可靠的科學依據，協助偵查人員釐清案情，並為法院提供有力的證物。此學科的嚴謹性確保了鑑定結果的準確性與可信度，是現代刑事偵查不可或缺的一環。
此領域涵蓋多種專業分析技術，其應用範圍廣泛且深入。例如，在潛伏指紋的顯現與鑑定方面，刑事化學家利用特定的化學試劑（如寧海德林、硝酸銀或1,2-茚二酮）與指紋中的胺基酸或脂肪酸等成分發生反應，使肉眼不可見的指紋顯現出來，為案件提供關鍵的身份線索。對於爆炸物，化學分析能鑑定其組成成分、來源及爆炸機制，有助於追溯炸彈製造者。在槍擊殘跡的檢測上，則能透過分析火藥燃燒後的無機或有機微粒，判斷是否曾開槍或與槍枝接觸。
此外，刑事化學亦負責毒品及濫用藥物的確認與定量分析，包括對藥物成分、純度以及在生物樣本中代謝產物的鑑定，這對於毒品案件的偵辦及藥物濫用者的追蹤至關重要。對於如纖維、油漆、玻璃、土壤、墨水等微量證物，化學分析能夠比對其物理化學特性，建立證物與犯罪現場或嫌疑人之間的連結。透過精密的化學分析技術，如光譜學、層析法和質譜法，刑事化學家能夠從微小或看似無關的線索中，提取出對案件偵破具有關鍵意義的資訊，為司法公正提供堅實的科學基礎。
潛伏指紋之顯現方法
以下介紹兩種常用於刑事鑑識的潛伏指紋顯現技術。
1
氯離子顯現法 - 原理
利用指紋中的氯離子與硝酸銀反應形成氯化銀。指紋中的汗液含有氯化鈉等無機鹽類，硝酸銀溶液會與氯離子反應生成白色氯化銀沉澱，在光照下轉變為深褐色或黑色，顯現出指紋紋路。
氯離子顯現法 - 處理程序
準備5-10%的硝酸銀水溶液
將溶液噴灑於檢體表面
在自然光或紫外光下曝曬
以蒸餾水沖洗並待乾燥後拍照
粉末顯現法 - 原理
利用指紋殘留物中的油脂、蛋白質等成分具有黏附性，使顯現粉末附著在指紋脊線上。主要適用於非吸收性表面，如玻璃、金屬、塑料等光滑表面的潛伏指紋顯現。
粉末顯現法 - 處理程序
選擇適合的顯現粉末（黑色、白色、熒光粉等）
使用指紋刷輕輕蘸取粉末並在表面輕刷
輕輕吹去多餘粉末
用指紋膠帶提取或直接拍照記錄
有關指紋辨識，請回答下列問題： (一)圖示和說明指紋分類的弧型紋型之特徵。（6 分） (二)說明微粒子試劑顯現潛伏指紋的原理和適用樣本。（8 分） (三)說明存留在刑事案現場的潛伏指紋之現場直接偵查方法。（6 分）
1
弧型紋型之特徵
弧型紋是指紋分類中最簡單的一種紋型，特徵為指紋紋路從一側進入，向上隆起形成弧形，然後從另一側流出，沒有三角點或內迴轉。分為兩種：
普通弧型：呈平緩的弧形
帳篷弧型：中央有一個較為明顯的隆起，形似帳篷
弧型紋在人群中的出現頻率約為5%，是所有紋型中最少見的一種。
微粒子試劑顯現潛伏指紋的原理和適用樣本
微粒子試劑顯現法利用膠體金屬粒子（如金、銀等）與指紋殘留物中的蛋白質和胺基酸等成分發生反應，使金屬粒子沉積在指紋脊線上。
優點：靈敏度高，可顯現較老的潛伏指紋
適用表面：
多孔性表面（紙張、木材）
非多孔性表面（塑料、玻璃）
已經用其他方法處理過但效果不佳的樣本
常見方法：多金屬沉積法（MMD）和單金屬沉積法（SMD）
潛伏指紋之現場直接偵查方法
光學檢查法：使用不同角度光源照射，利用光反射原理觀察
粉末顯現法：在非吸收性表面上使用指紋粉末直接顯現
熒光粉末法：使用熒光粉末顯現後，在特定波長光源下觀察
氰基丙烯酸酯煙燻法：在密閉空間中使用瞬間膠煙燻顯現
便攜式光源檢查：使用不同波長光源（紫外光、藍光等）直接檢查
有關指紋辨識，請回答下列問題： (一)指紋是辨識個人和比對身分最可信賴的證物之一，說明主要原因。（6 分） (二)說明潛伏指紋的化學顯現原理，以硝酸銀顯現法為例，詳述機制。（8 分） (三)說明熱感紙上潛伏指紋的顯現方法。（6 分）
1
指紋作為可信賴證物的主要原因
指紋被視為辨識身分最可信賴的證物，主要基於：獨特性（每人指紋獨一無二）、永久性（終生不變）、普遍性（人人皆有）、可分類性（系統性分類便於比對）及易於採集（簡單且可從多種表面取得）。
硝酸銀顯現法的機制
硝酸銀顯現法原理：指紋中汗液含氯化鈉，噴灑硝酸銀溶液後發生反應（AgNO₃ + NaCl → AgCl↓ + NaNO₃），形成白色氯化銀沉澱。光照下氯化銀分解（2AgCl → 2Ag + Cl₂），產生深褐色銀，使指紋紋路可見。適用於紙張等多孔性表面。
3
熱感紙上潛伏指紋的顯現方法
熱感紙指紋顯現方法：直接加熱法（利用指紋油脂阻礙熱感紙變色）、1,2-茚二酮法（與胺基酸反應產生熒光）、寧海德林法（使用改良溶液避免背景變黑）、熒光粉末法及RTX法（反射紫外成像系統直接觀察）。
有關爆炸物及射擊殘跡，以射擊殘跡為例，請回答下列問題： (一)射擊殘跡之形成。（10 分） (二)射擊殘跡之分析及判定。（10 分）
射擊殘跡之形成
射擊殘跡（Gunshot Residue, GSR）是在槍械射擊過程中形成的物質殘留物：
當擊錘撞擊底火時，底火中的起爆藥被引爆，產生高溫（1500-2000°C）和高壓
高溫環境下，底火中的金屬成分（鉛、鋇、銻等）被氣化
金屬蒸氣離開槍口後迅速冷卻，凝結成微小球形顆粒
這些顆粒沉積在射擊者手部、臉部和衣物上
射擊殘跡主要來源於底火成分、推進火藥和彈頭/彈殼材料，其中底火成分最具鑑識價值。
射擊殘跡之分析
射擊殘跡的分析涉及以下方法：
使用碳膠帶或採樣貼片從可疑人員手部採集樣本
掃描電子顯微鏡（SEM）觀察顆粒形態特徵
能量散射X射線分析（EDX）確定元素組成
射擊殘跡之判定
判定標準包括：
特徵性GSR：含有鉛、鋇、銻三種元素的顆粒
高度指示性GSR：含有上述元素中的兩種
一般指示性GSR：僅含單一元素或其他相關組合
需考慮環境污染、職業暴露等因素，並結合顆粒形態、元素組成和案件情況綜合判斷。
射擊殘跡鑑識是調查槍殺案的重要工具。請回答下列問題： (一)說明射擊殘跡可以協助研判的疑點。（6 分） (二)說明無機射擊殘跡各成分的可能來源，以及無機射擊殘跡的外觀和組成特性。 （8 分） (三)說明最常用來鑑識無機射擊殘跡的儀器方法，包括原因。（6 分）
射擊殘跡可協助研判的疑點
確認射擊行為：殘跡存在可證明嫌疑人曾接觸或使用槍械
射擊距離判定：通過殘跡分佈密度和範圍可估計射擊距離
自殺與他殺區分：殘跡分佈特徵可協助區分自殺與他殺案件
彈藥類型識別：不同彈藥產生不同特徵殘跡，有助確定使用彈藥
無機射擊殘跡的來源、外觀和組成特性
主要來源：
底火成分：含起爆藥和氧化劑（如雷汞、硝酸鉀）
金屬成分：來自底火杯（銅、鋅）和底火藥（鉛、鋇、銻）
外觀和組成特性：
形態：典型GSR顆粒呈球形或類球形，直徑約0.5-10微米
元素組成：傳統底火產生的特徵性GSR含有鉛、鋇和銻三種元素
鑑識無機射擊殘跡的儀器方法
最常用方法：掃描電子顯微鏡結合能量散射X射線分析（SEM-EDX/EDS）
高分辨率：能清晰觀察微小GSR顆粒的形態特徵
元素分析能力：可同時分析顆粒中的多種元素組成
非破壞性：不會破壞樣本，允許後續進行其他分析
高特異性：結合形態和元素組成分析，提供高度特異的鑑定結果
在詐騙集團案件中，常發現偽簽支票、偽造鈔券、恐嚇信件等重要證物。刑事鑑識 實驗室近年來用1,2-indanedione（1,2-茚二酮）來代替寧海德林（Ninhydrin）顯現偽 簽支票上的潛伏指紋。請回答下列問題： (一)請說明 1,2-indanedione 顯現潛伏指紋可能用到之關鍵試劑，並寫出 1,2-indanedione 顯現潛伏指紋與胺基酸的化學反應機構。 （10 分） (二)請說明 1,2-indanedione 顯現潛伏指紋的程序。（5 分） (三)如果偽簽支票上經過 1,2-indanedione 顯現過的指紋還是不明顯，請說明如何用多重 金屬沉積法（MMD : Multimetal Deposition）二次增顯？請寫出原理與程序。（10 分）
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1,2-indanedione顯現潛伏指紋的關鍵試劑與反應機構
關鍵試劑：1,2-indanedione（主要反應物）、鋅氯化物（催化劑和穩定劑）、冰醋酸（提供酸性環境）、非極性溶劑（石油醚/正己烷）、極性溶劑（乙醇/丙酮）
反應機構：與指紋中的α-胺基酸反應形成席夫鹼中間體，經脫羧和重排反應，最終形成粉紅色的Ruhemann's紫色物質，在特定波長光照下產生熒光，增強檢測靈敏度。
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1,2-indanedione顯現潛伏指紋的程序
配製工作溶液（含1,2-indanedione、鋅氯化物、冰醋酸和適當溶劑）
浸泡或噴灑溶液後風乾
80-100°C烘箱加熱約10分鐘
綠光或藍光下觀察熒光反應
必要時置於高濕度環境進一步增強效果
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多重金屬沉積法（MMD）二次增顯的原理與程序
原理：金膠體粒子以靜電和疏水相互作用附著在指紋脊線上；銀離子在金粒子表面被還原沉積，形成金-銀複合物增強可見度。
程序：
去離子水清洗檢體
酸化處理（pH值2.5-3.0）
浸入金膠體溶液20-30分鐘
去離子水清洗
物理顯影（銀離子和還原劑溶液）
停止液停止反應，清洗、風乾並拍照記錄
試敘述有關酵素結合免疫吸附分析法（Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）： (一)作用原理及特性與優點介紹。（6 分）
1
ELISA的作用原理
基於抗原-抗體特異性結合和酵素催化反應的免疫分析技術。抗原或抗體固定在微孔板上，加入樣品後，目標物質與固相結合。標記酵素的抗體再與複合物結合，最後通過酵素催化底物產生信號，測量信號強度來分析樣品中的目標物質。
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ELISA的特性
高特異性：精確識別目標分子
高靈敏度：可檢測皮克或納克級別的物質
定量能力：通過標準曲線實現準確定量
多樣性：可設計多種形式（直接法、間接法等）
穩定性：酵素標記物相對穩定，可長期保存
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ELISA的優點
操作簡便：標準化流程，易於執行
高通量：同時處理大量樣品
成本效益高：設備和試劑成本較低
安全性：不使用放射性物質
廣泛適用性：可檢測各種生物分子
結果可視化：通過顏色變化直觀判斷
試敘述有關酵素結合免疫吸附分析法（Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）： (一)作用原理及特性與優點介紹。（6 分）
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ELISA的基本原理
酵素結合免疫吸附分析法基於抗原-抗體特異性結合和酵素催化反應。將酵素標記在抗體上，當抗體與目標抗原結合後，添加酵素底物產生可檢測信號，信號強度與目標物質濃度相關，從而實現定性或定量分析。
ELISA的特性
高特異性：精確識別目標分子
高靈敏度：可檢測pg/mL或ng/mL級別的物質
良好的重複性和定量能力
多樣性：可設計直接法、間接法、三明治法、競爭法
ELISA的優點
操作簡便：標準化流程，易於執行
高通量：可同時處理大量樣品
成本效益高和安全性好
廣泛適用於各種生物分子檢測
自動化程度高，適用於複雜樣品
新興精神活化物資（NPS）分類及其作用機轉與毒性
依據聯合國毒品及犯罪辦公室與歐洲毒品及毒品成癮監測中心（EMCDDA）的分類
合成大麻素類（Synthetic Cannabinoids）
代表：JWH-018（K2、Spice）
作用機轉：結合CB1和CB2受體，模擬THC作用但效力更強。
毒性：心血管效應、精神症狀（焦慮、幻覺）、癲癇發作、腎損傷，毒性風險高於天然大麻。
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合成卡西酮類（Synthetic Cathinones）
代表：甲氧麥角酮（Mephedrone、喵喵）
作用機轉：增加多巴胺、去甲腎上腺素和血清素濃度，產生類似安非他命效果。
毒性：心血管毒性、高體溫、橫紋肌溶解症、腎衰竭及精神症狀如幻覺和攻擊性。
苯乙胺類（Phenethylamines）
代表：25I-NBOMe（N-炸彈）
作用機轉：激活5-HT2A血清素受體，導致強烈幻覺和感知改變。
毒性：心血管影響、高體溫、癲癇發作、多器官衰竭風險高，精神毒性包括幻覺和自殘行為。
色胺類（Tryptamines）
代表：5-MeO-DMT
作用機轉：作用於5-HT2A受體，結構與血清素相似，產生強烈幻覺。
毒性：自主神經系統過度活躍、體溫升高、血清素綜合徵，精神毒性包括嚴重幻覺和解離。
新興精神活化物資 (NPS) 分類與作用機轉
依聯合國毒品及犯罪辦公室與歐洲毒品及毒品成癮監測中心 (EMCDDA) 分類的新興精神活化物資及其特性：
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哌嗪類（Piperazines）
代表性毒品：BZP（1-苄基哌嗪）
作用機轉：增加多巴胺和血清素釋放，抑制再攝取，產生類似安非他命興奮效果。
毒性：心血管毒性、癲癇風險、高體溫、嚴重失眠、焦慮、幻覺。
芬太尼類似物（Fentanyl Analogues）
代表性毒品：卡芬太尼（Carfentanil）
作用機轉：強效μ-阿片受體激動劑，抑制中樞神經系統，產生鎮痛和欣快感。
毒性：呼吸抑制風險高，微量接觸即可致命，導致意識喪失、縮瞳。
苯環利定類（Arylcyclohexylamines）
代表性毒品：甲氧氯胺酮（Methoxetamine，MXE）
作用機轉：NMDA受體拮抗劑，阻斷谷氨酸作用，導致解離狀態和麻醉效果。
毒性：心血管毒性、協調障礙、認知障礙、嚴重解離、幻覺。
植物源性物質（Plant-based Substances）
代表性毒品：卡痛葉（Kratom）
作用機轉：作用於μ-阿片受體，低劑量時有興奮作用，高劑量時類似阿片類藥物。
毒性：噁心、嘔吐、失眠、高劑量可引起呼吸抑制、癲癇、肝毒性，長期使用致成癮。
布魯塞爾發生之三起爆炸事件中，恐怖分子疑似使用三過氧化三丙酮（triacetone triperoxide, TATP）爆炸物。請回答下列問題： (一)簡述 TATP 製備方法，說明其被稱自製炸彈的原因。（6 分） (二)圖示 TATP 化學結構式，說明其被歸為一級或二級炸藥的原因。（8 分） (三)說明快速篩檢 TATP 的質譜分析法。（6 分）
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TATP製備方法及自製炸彈原因
製備方法：將丙酮與過氧化氫在低溫條件下混合，加入少量強酸作為催化劑，攪拌反應後過濾收集白色晶體，洗滌並風乾。
被稱為自製炸彈原因：
原料易得性：丙酮和過氧化氫都是常見家用化學品
製備簡易：不需專業設備，只需基本化學知識
難以檢測：不含金屬或硝基等常規爆炸物特徵元素
威力強大：爆炸威力與TNT相當，但極不穩定
TATP化學結構式及炸藥分類原因
化學結構：環狀結構，含有三個-O-O-過氧鍵連接三個碳原子，每個碳原子上連接兩個甲基（-CH₃）。
歸為一級炸藥原因：
高敏感性：對熱、摩擦、震動和靜電極為敏感
自身引爆能力：不需外部引爆裝置即可爆炸
爆轟速度高：約為5300米/秒，接近軍用炸藥
分子結構不穩定：含有高能量的過氧鍵（-O-O-）
快速篩檢TATP的質譜分析法
主要分析方法：
離子遷移譜（IMS）：現場快速檢測TATP蒸氣，檢測時間短
大氣壓化學電離質譜法（APCI-MS）：可直接分析TATP，檢測限低至ppb級
便攜式拉曼光譜儀：可通過密封容器非破壞性檢測
氣相色譜-質譜法（GC-MS）：高特異性和靈敏度，適合實驗室確證分析
IMS和便攜式拉曼光譜儀最適合現場快速篩檢，APCI-MS和GC-MS適用於實驗室分析。
在刑事鑑識上經常將化學分離法與質譜法結合，以達到混合物分離與結構鑑定之功能，請回答下列相關問題： (1) 說明 Temperature programming、Pressure programming、pH gradient 適用在那種分析儀器？其分離上之應用為何？（15 分） (2)在質譜分析時，比較 Full scan 與 Selected ion monitoring 在定性與定量鑑定上之應用？（10 分）
1
Temperature programming 的應用
適用儀器：氣相層析儀（Gas Chromatography, GC）
分離應用：通過程式化控制柱溫隨時間升高，使不同揮發性的化合物在不同溫度下洗脫。適用於毒品、爆炸物殘留物、縱火劑等複雜混合物分析。低沸點化合物在低溫下洗脫，高沸點化合物在高溫下洗脫，避免峰展寬和重疊。
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Pressure programming 的應用
適用儀器：氣相層析儀（GC）和超臨界流體層析儀（SFC）
分離應用：通過程式化控制載氣或流動相壓力變化，調節流速和分離選擇性。在GC中用於控制載氣流速，在SFC中用於調節超臨界流體密度。提高色譜峰的形狀和分離度，特別適用於分析熱敏感或高沸點化合物。
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pH gradient 的應用
適用儀器：高效液相層析儀（HPLC）和毛細管電泳（CE）
分離應用：通過程式化控制流動相pH值變化，改變分析物的電離狀態和親水/親脂性。適用於分離藥物、代謝物、蛋白質等含有酸鹼基團的化合物。在不同pH值下，分析物的電離狀態不同，與固定相的相互作用也不同，從而實現分離。
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Full scan 與 Selected ion monitoring 的比較
Full scan（全掃描模式）：質譜儀掃描所有離子，提供完整質譜圖。優點是獲取全面結構信息，適合未知物鑑定；缺點是靈敏度低（ppb至ppm級別），不適合微量分析。
Selected ion monitoring（選擇離子監測）：只監測預選定的特徵離子。優點是靈敏度高（可達ppt級別），適合複雜基質中的微量分析；缺點是結構信息有限，需預知目標化合物特徵離子。
實務應用：先用Full scan進行初步篩查和未知物鑑定，再用SIM進行確證分析和精確定量。
羊毛為刑事案件常涉及之纖維。請回答下列問題： (一)說明羊毛纖維的組成和顯微鏡下觀察到的特徵。（6 分） (二)說明熱裂解氣相層析質譜法原理，分析羊毛纖維之熱裂解產物。（8 分） (三)說明蒐集證物時，如何避免羊毛纖維產生再傳遞的注意事項。（6 分）
1
羊毛纖維的組成和顯微鏡特徵
組成：主要為角蛋白（80-90%），含豐富硫胺基酸，次要成分包括脂質、礦物質和水分。
顯微鏡特徵：
表面有特徵性重疊鱗片結構，呈鋸齒狀邊緣
中心可能有髓質，直徑10-50微米，自然捲曲
橫截面呈圓形或橢圓形，在偏光下呈雙折射性
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熱裂解氣相層析質譜法原理及羊毛纖維熱裂解產物
原理：高溫（400-700°C）下使樣品裂解為小分子，通過氣相層析分離後進入質譜儀檢測。
羊毛纖維主要熱裂解產物：
含硫化合物：源自半胱氨酸中的二硫鍵
芳香族化合物：源自酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸
含氮化合物和脂肪酸衍生物
這些特徵性產物可用於區分羊毛與其他纖維。
避免羊毛纖維再傳遞的注意事項
穿著無纖維脫落的防護裝備（防護服、手套、口罩）
使用無纖維工具，遵循一次性使用原則
正確採集順序：先易脫落表面證物，再其他證物
適當包裝：單獨包裝每件證物，避免相互接觸
在無風、乾燥環境中輕柔處理，詳細記錄採集過程
建立現場環境和採集人員的纖維對照樣本
車禍現場汽車油漆殘跡鑑識，是調查車禍原因的重要工具。請回答下列問題： (一)說明汽車油漆之塗裝結構。（6 分） (二)說明汽車油漆殘跡之物理特徵，以及現場樣品之採取步驟。（8 分） (三)說明掃描電子顯微鏡 /X-射線能譜法（SEM/EDX）的分析特性。（6 分）
汽車油漆之塗裝結構
汽車油漆通常由多層結構組成：
電泳底漆層：附著在金屬表面，提供防腐蝕保護
底漆層：提供附著力和平滑表面
色漆層：提供顏色和遮蓋力
清漆層：最外層透明保護層，提供光澤和耐候性
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汽車油漆殘跡之物理特徵
層狀結構：可見明顯的多層結構，每層顏色和厚度不同
顏色：根據車型和製造商有不同的顏色系統
形態：可能呈現碎片、刮痕或轉移痕跡
表面特徵：可能保留碰撞時的痕跡
現場樣品之採取步驟
記錄和拍攝：詳細記錄油漆殘跡的位置和形態
採集：使用鑷子刮取完整的油漆碎片
對照樣本：從涉案車輛採集完整油漆樣本作對照
包裝和標記：放入紙袋並標記來源信息
保存：避免高溫、高濕和陽光直射
SEM/EDX的分析特性
高分辨率成像：提供納米級分辨率的表面形態圖像
元素分析：識別特徵性顏料和添加劑
微區分析：可針對微小區域進行分析
元素分佈圖：顯示不同元素在樣品中的空間分佈
截面分析：研究油漆的層狀結構和元素分佈
洛卡交換定律提出的痕跡證據，對沒有生物證據的案件，是破案的重要關鍵。有關痕跡證據，請回答下列問題：(一)洛卡交換定律及其應用。（10分）(二)玻璃及纖維痕跡證據分析。（15分）
洛卡交換定律及其應用
埃德蒙·洛卡（Edmond Locard）於20世紀初提出："每一次接觸都會留下痕跡"。犯罪者會在現場留下某些東西，同時也會帶走某些東西。
應用於犯罪現場勘查、物證關聯分析及行為重建
通過痕跡證據排除或確認嫌疑人
促進微量證據分析技術發展，建立完整證據鏈
玻璃痕跡證據分析
物理特性分析：折射率測定、密度測定、顏色及厚度測量
化學成分分析：X射線熒光分析(XRF)、SEM/EDX、ICP-MS等
碎裂痕跡分析：放射狀裂紋、同心圓裂紋分析及碎片拼合
纖維痕跡證據分析
顯微鏡檢查：立體顯微鏡、偏光顯微鏡、電子顯微鏡觀察
光譜分析：紫外-可見光譜、紅外光譜(FTIR)、拉曼光譜
化學分析：薄層色譜(TLC)、高效液相色譜(HPLC)、Py-GC/MS
物理特性測試：熔點測定、溶解性及燃燒測試
在紙張上的指紋檢驗有硝酸銀法與寧海德林法，請回答下列相關問題： (一)請說明硝酸銀法之原理。（10 分） (二)請說明寧海德林法之原理。（10 分） (三)請比較其應用時機。（5 分）
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硝酸銀法之原理
硝酸銀法是基於指紋中的氯離子與硝酸銀反應形成氯化銀的原理：
指紋汗液含有氯化鈉（NaCl）等無機鹽類
硝酸銀（AgNO₃）溶液與氯離子反應：AgNO₃ + NaCl → AgCl↓ + NaNO₃
形成的白色氯化銀（AgCl）沉澱物沉積在指紋脊線上
在光照（尤其是紫外光）下，氯化銀分解：2AgCl → 2Ag + Cl₂
分解產生的銀呈現深褐色或黑色，使指紋紋路清晰可見
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寧海德林法之原理
寧海德林法基於寧海德林與指紋中的胺基酸反應生成紫色化合物：
指紋汗液含有多種胺基酸
寧海德林與胺基酸的α-氨基（-NH₂）反應，形成席夫鹼中間體
席夫鹼中間體經過脫羧和氧化反應
最終形成Ruhemann's紫色化合物
紫色化合物沉積在指紋脊線上，顯現指紋紋路
通常在室溫下反應24-48小時，或在高溫高濕條件下加速反應。
應用時機比較
硝酸銀法：
適用於新鮮指紋（通常不超過一週）
適合含有高濃度氯離子的指紋
不適用於已被水浸泡過的紙張（氯離子已流失）
寧海德林法：
適用於較老的指紋（可顯現數月甚至數年的指紋）
是紙質文件上潛伏指紋顯現的首選方法
可用於已被水浸泡過的紙張（胺基酸與纖維結合較牢固）
可與其他方法（如DFO、1,2-茚二酮）序貫使用
根據文獻記載，保存 40 年的指紋尚可採驗，這令鑑識人員振奮，然而並非每種顯現潛伏指紋的方法都可如此，有關潛伏指紋顯現，請回答下列問題： (1) 說明以寧海德林法與硝酸銀法可顯現遺留於紙張上潛伏指紋之時間差異？ (2)說明碘燻法可顯現遺留於檢體上潛伏指紋之大約時間，有無改進的方法？ (3)絲胺酸（Serine）為指紋成分中胺基酸含量最多者，以其為例，說明以寧海德林法顯現潛伏指紋之化學反應機制？ (4)若以寧海德林法顯現出的指紋紋線與背景相近，再以二次金屬離子處理，其反應機制為何？效果如何？
寧海德林法與硝酸銀法顯現潛伏指紋的時間差異
寧海德林法：可顯現存留數月至數十年的潛伏指紋，因胺基酸與紙張纖維結合牢固，即使經過數十年仍可能顯現。
硝酸銀法：主要適用於新鮮指紋，通常不超過2-3週。由於氯離子容易流失或被環境污染，長期存留的指紋顯現效果較差。
碘燻法顯現潛伏指紋的時間及改進方法
可顯現時間：通常僅適用於非常新鮮的指紋，一般不超過48小時，且顯現的指紋不穩定。
改進方法：碘-澱粉反應、碘-7,8-苯並黃烴反應、碘-α-萘酚反應、碘蒸氣轉移技術、碘燻-氰基丙烯酸酯序貫法等。這些方法可將暫時性指紋轉變為穩定的永久性指紋。
絲胺酸與寧海德林的化學反應機制
反應步驟：
寧海德林與絲胺酸的α-氨基反應，形成席夫鹼中間體
中間體發生脫羧反應，失去二氧化碳
脫羧後的中間體與另一分子寧海德林反應
經過重排和氧化反應
最終形成Ruhemann's紫的紫色化合物
此反應對α-氨基酸具高度特異性，最終產物在可見光下呈現紫色。
4
二次金屬離子處理的反應機制及效果
反應機制：寧海德林反應產物與金屬離子（如鋅、鎘、銀等）形成配合物，產生不同顏色和熒光特性。
效果：增強顏色對比度、產生熒光、提高穩定性和靈敏度、擴展適用性。鋅鹽處理（寧海德林-鋅法）最為常用，可產生橙紅色指紋，並在綠光照射下產生橙色熒光。
有關血跡潛伏指紋的顯現，請回答下列問題：(一)潛伏指紋出現的選擇原則。（10分）(二)血跡潛伏指紋顯現的原理。（15分）
1
潛伏指紋顯現的選擇原則
選擇潛伏指紋顯現方法時，應考慮以下原則：
表面特性：多孔性表面適用化學顯現法（寧海德林法、DFO法）；非多孔性表面適用物理顯現法（粉末法、氰基丙烯酸酯法）
指紋年齡：新鮮指紋幾乎所有方法都適用；陳舊指紋化學方法通常優於物理方法
指紋成分：油脂豐富適用粉末法；胺基酸豐富適用寧海德林法；無機鹽豐富適用硝酸銀法
表面顏色：淺色表面使用產生深色反應的方法；深色表面使用熒光顯現法
非破壞性原則：優先選擇非破壞性方法，按從非破壞到破壞的順序嘗試
血跡潛伏指紋顯現的原理
血跡潛伏指紋是指含有血液成分的指紋，其顯現原理主要基於血液中的特殊成分，特別是血紅蛋白。常用顯現方法及原理：
茚藍法：茚藍與血液中蛋白質結合形成藍黑色複合物，適用於非多孔性表面
亮藍法：與血液蛋白質結合形成藍色複合物，適用於深色表面
鄰苯二胺法：與血液中過氧化物酶反應，在過氧化氫存在下產生藍綠色產物
發光法：魯米諾與血紅蛋白中的鐵反應產生化學發光，極高靈敏度
二氨基苯並噻唑法：與血液中過氧化物酶反應產生棕色產物，穩定性好
有關濫用藥物及危險毒物，以甲基安非他命尿液為例，請回答下列問題： (一)初步檢驗方法、原理及結果判定。（10 分） (二)確認檢驗方法、原理及結果判定。（10 分）
1
初步檢驗方法
免疫分析法（如ELISA、FPIA、RIA、EMIT、快速檢測卡）和呈色反應法（如西蒙氏試劑、馬奎斯試劑）
2
初步檢驗原理
免疫分析法基於抗原-抗體特異性結合反應，當樣品中存在甲基安非他命時，會與抗體結合產生可檢測信號。呈色反應法則基於甲基安非他命與特定試劑發生化學反應產生特徵性顏色變化。
3
初步檢驗結果判定
以閾值（通常為500 ng/mL）為標準，信號強度或顏色變化超過閾值判定為陽性，表明樣品中可能存在甲基安非他命。初步檢驗可能存在假陽性，需進行確認檢驗。
4
確認檢驗方法
氣相層析-質譜法（GC-MS、GC-MS/MS）和液相層析-質譜法（LC-MS、LC-MS/MS、HPLC-MS）
5
確認檢驗原理
樣品經萃取純化後，GC-MS通常需衍生化處理提高揮發性。利用層析柱分離樣品中的各組分，再通過質譜檢測特徵離子，實現高特異性鑑定。
6
確認檢驗結果判定
定性判定：保留時間與標準品一致（±2%）且至少3個特徵離子比例符合（±20%）。定量判定：內標法確定濃度，通常閾值為250 ng/mL。同時滿足定性和定量要求且濃度超過閾值判定為陽性。
一名長期毒品濫用者的尿液毒品檢測結果有嗎啡反應，嫌犯辯稱為止咳藥水處方內含有可待因，如何釐清或進一步檢驗確認是海洛因吸食的結果？（20 分）
了解代謝途徑差異
海洛因（二乙醯嗎啡）在體內迅速水解為6-乙醯嗎啡（6-AM），再代謝為嗎啡；可待因（甲基嗎啡）約10%通過O-脫甲基化代謝為嗎啡。僅憑嗎啡陽性無法區分來源。
檢測特異性代謝物
檢測6-乙醯嗎啡（6-AM）：此為海洛因使用的唯一特異性標誌物，可待因不會產生6-AM。使用GC-MS或LC-MS/MS檢測，檢出窗口約8-24小時。若檢出即可確認海洛因使用。
分析濃度比值
海洛因使用者尿液中嗎啡/可待因比值通常>1（尤其>5）；可待因使用者該比值通常<1。使用GC-MS或LC-MS/MS同時定量兩種物質，高比值強烈提示海洛因使用。
檢測葡萄糖醛酸苷
分析嗎啡-3-葡萄糖醛酸苷（M3G）和嗎啡-6-葡萄糖醛酸苷（M6G）：海洛因使用者M3G/M6G比值約5-6；可待因使用者該比值通常>10。使用LC-MS/MS方法區分和定量。
毛髮分析
毛髮可保留藥物使用記錄數月。海洛因使用者毛髮中通常可檢測到6-AM，毛髮中6-AM/嗎啡比值>0.02提示海洛因使用。分段分析可提供時間序列用藥信息。
處方記錄與綜合判斷
核查處方記錄（日期、劑量和用藥頻率），計算預期尿液嗎啡濃度範圍。結合6-AM檢測、濃度比值分析、毛髮檢測結果及臨床症狀（如注射痕跡）進行綜合判斷。
一名長期毒品濫用者的尿液毒品檢測結果有嗎啡反應，嫌犯辯稱為止咳藥水處方內含有可待因，如何釐清或進一步檢驗確認是海洛因吸食的結果？（20 分）
檢測6-乙醯嗎啡（6-AM）
6-AM是海洛因特異性代謝物，可待因不會代謝產生此物質。使用GC-MS或LC-MS/MS檢測尿液中的6-AM，若檢出即可確認為海洛因使用。檢出窗口約8-24小時。
嗎啡/可待因濃度比值分析
海洛因使用者尿液中嗎啡/可待因比值通常>1（常>5），而單純可待因使用者該比值通常<1。使用GC-MS或LC-MS/MS方法同時定量兩種物質。
3
嗎啡葡萄糖醛酸苷異構體分析
嗎啡在體內形成M3G和M6G兩種異構體。海洛因使用者M3G/M6G比值通常在5-6之間，可待因使用者該比值通常>10。
毛髮分析
毛髮可保留藥物使用記錄長達數月。海洛因使用者毛髮中通常可檢測到6-AM，毛髮中6-AM/嗎啡比值>0.02通常提示海洛因使用。分段分析可提供時間序列的用藥信息。
藥物處方記錄核查與綜合判斷
核實處方記錄，檢視劑量與用藥頻率。比較實際檢測濃度與預期濃度是否一致。結合多項檢測結果和臨床表現（如注射痕跡、戒斷症狀等）進行綜合判斷。
注意：單純檢測到嗎啡無法區分來源，因為海洛因（二乙醯嗎啡）在體內迅速水解為6-AM再代謝為嗎啡，而可待因（甲基嗎啡）也有約10%通過O-脫甲基化代謝為嗎啡。
有關化學呈色初步試驗毒品，以海洛因為例
化學呈色試劑在毒品初步檢測中的應用原理與注意事項
1
馬奎斯試劑（Marquis reagent）原理
由濃硫酸和甲醛組成，用於檢測含芳香環結構的生物鹼類毒品。海洛因呈現紫色到紫紅色，隨後變為深紫色。陽性反應表示樣品可能含有鴉片類、安非他命類等特定結構毒品。
2
馬奎斯試劑注意事項
含強腐蝕性濃硫酸，需佩戴防護裝備；應避光密封保存；保質期3-6個月；使用少量樣品(1-2毫克)；應進行對照試驗；立即判讀結果；注意可能的假陽性；結果需進一步確認。
3
麥克試劑（Mecke reagent）原理
由濃硫酸和鉬酸組成，用於區分馬奎斯試劑呈陽性的毒品種類。海洛因呈現橄欖綠到藍綠色；嗎啡呈深藍到藍紫色；可待因呈藍綠到綠色；MDMA呈深藍到黑色。
4
麥克試劑注意事項
與馬奎斯試劑類似需做好防護；保質期較短(1-3個月)；應記錄初始顏色和變化過程；觀察至少1-2分鐘；注意交叉反應；使用新樣品進行測試；在一致光線下觀察；立即記錄結果；需儀器分析確認。
面對當前毒品泛濫、吸毒年齡層下降，而新興毒品入侵校園與軍中等現象，請依政府近日宣布新世代反毒策略之理解回答下列問題： (一)一至四級毒品中，每一級至少列舉兩種，說明其成癮性、濫用性及對社會危害性之意義。（15 分） (二)有關偽陽性中（海洛因可以代謝成嗎啡，甲基安非他命可以代謝成安非他命之代謝途徑）如何解釋下列結果？ 1.假釋中的煙毒犯，尿中測得有海洛因反應，但無嗎啡反應。（5 分） 2.某航空公司飛行駕駛員尿中測得甲基安非他命反應，但是無安非他命反應？（5 分）
一級毒品
1. 海洛因：極高成癮性，注射或吸食，易導致過量死亡，使用者常犯罪獲取毒資
2. 古柯鹼：高度心理依賴，鼻吸或注射，導致心血管疾病，使用者常涉暴力犯罪
二級毒品
1. 甲基安非他命：高成癮性，長期使用導致精神病症狀，使用者常表現暴力行為
2. 大麻：中等心理依賴，影響認知和記憶力，降低學習能力，對青少年大腦發育有害
三級毒品
1. 氯胺酮（K他命）：中等依賴性，長期使用導致膀胱損傷，認知功能下降
2. 佐沛眠（安眠藥）：中低成癮性，過量使用導致記憶喪失，與酒精混用可能致命
四級毒品
1. 二氫可待因（咳嗽藥水）：低至中等依賴性，青少年易取得並濫用，可能引導使用更強效毒品
2. 苯丙胺（減肥藥成分）：低度心理依賴，過量使用可能導致心血管問題
假釋煙毒犯檢測結果解釋
尿中有海洛因反應但無嗎啡反應，可能原因：
檢測方法問題或樣本污染
樣本摻假：尿液中直接添加少量海洛因混淆結果
採集時間不當，錯過嗎啡檢出窗口
結果可疑，應重新採樣並使用GC-MS等準確方法確認
飛行駕駛員檢測結果解釋
尿中有甲基安非他命反應但無安非他命反應，可能原因：
剛使用不久，尚未產生可檢測量的安非他命
代謝率個體差異或藥物相互作用
可能使用含偽麻黃鹼等成分的感冒藥，導致假陽性
應立即進行確認檢測，並採集頭髮樣本分析長期用藥史
酒精測試器認證保養與檢測過程原則
作為派出所所長，執行酒駕取締勤務時應確保呼氣酒精測試器的正確使用，以下為重要原則：
使用前之認證與校正
確認測試器已通過標準檢驗局法定檢定並取得合格證書
檢查校正標籤是否在有效期內（每六個月校正一次）
使用標準濃度乙醇氣體（0.25mg/L）進行校正檢查
日常保養與維護
定期清潔測試器外部和吹嘴接口，避免污染
檢查電池電量，確保測試過程不會因電量不足而中斷
儀器存放在乾燥環境，避免潮濕損壞感應器
檢測前準備
每日使用前進行空白測試，確認讀數為零
使用新的一次性吹嘴，確保衛生並防止交叉污染
要求受測者等待至少15分鐘，避免口腔酒精殘留物干擾
4
測試過程操作
指導受測者深呼吸後持續穩定吹氣直到儀器發出信號
避免在有酒精蒸氣或強烈氣味環境中進行測試
若需多次測試，應遵守1-3分鐘的間隔時間
結果判讀與處理
依法規標準（呼氣酒精濃度達每公升0.25毫克）判定是否超標
初步測試結果超標時，進行第二次確認測試
準確記錄測試時間、地點、儀器編號和測試結果
你為派出所所長，目前我國警方於路邊執行酒駕取締勤務時，為求作業便利性，多採用手持式之呼氣酒精測試器執行檢測為主，其酒精檢測中所得的數據可為交通安全管理中「不安全駕駛」之依據，故依呼氣酒精測試器及分析儀檢定檢查技術規範相當重要，請列舉酒精測試器使用前之認證保養與使用檢測儀器檢測過程與原則（至少列舉五項）。 （20 分）
酒精測試器在執法實務中的重要性不言而喻，以下為其使用的關鍵時間點與準則：
儀器認證與檢定
確保測試器通過標準檢驗局的型式認證和初次檢定，符合國家標準CNS 15988規範要求，並每六個月進行一次法定校正
日常維護與保養
定期清潔儀器外部和吹嘴接口，檢查電池電量，確保存放在適當溫濕度環境，每月至少進行一次內部校正檢查
使用前檢查
每次使用前進行自我診斷和空白測試，確認儀器功能正常且基礎讀數為零，檢查校正標籤是否在有效期內
4
標準操作程序
使用新的一次性吹嘴，要求受測者等待至少15分鐘後再測試，指導正確呼氣方式，確保測試環境無酒精蒸氣干擾
結果確認與記錄
初測超過法定標準(每公升0.25毫克)應進行第二次確認測試，詳細記錄測試資訊作為執法依據，妥善保存相關數據確保證據鏈完整
特殊情況處理
制定明確程序處理儀器故障、拒絕測試或身體狀況特殊等情況，必要時依法執行送醫抽血檢測作為替代方案
呼氣酒精測定儀原理與品質管制
民國102年修定刑法第185條之3規定，吐氣所含酒精濃度達每公升0.25毫克或血液中酒精濃度達0.05%以上將依刑法論處。以下為呼氣酒精測定儀相關知識：
1
電化學燃料電池型測定儀原理
基於電化學原理，當含酒精的呼氣進入燃料電池時，乙醇在陽極氧化為乙醛和氫離子（CH₃CH₂OH → CH₃CHO + 2H⁺ + 2e⁻），釋放的電子通過外部電路流向陰極產生電流。此電流與乙醇濃度成正比，經轉換為數字讀數。具高選擇性、便攜性和穩定性。
2
紅外線分光法測定儀原理
基於不同分子對特定波長紅外線的吸收特性，乙醇在9.5微米波長處有特徵吸收峰。測量過程中，紅外線通過含呼氣樣本的測量室，乙醇吸收特定波長的紅外線，根據比爾-朗伯定律計算濃度。具高精度、快速響應和可靠性。
量測不確定度定義
量測不確定度是表征分散性數值的參數，合理地賦予測量結果的數值分散性。它反映測量結果可靠性的定量評估，表示在給定置信水平下，真值可能落在的區間範圍。
量測不確定度評估要項
儀器本身不確定度（分辨率、線性度、重複性、漂移）
校正不確定度（標準氣體濃度、校正曲線擬合誤差）
環境因素不確定度（溫度、壓力、濕度變化影響）
操作因素不確定度（採樣方式、呼氣深度和持續時間差異）
生理因素不確定度（呼吸道溫度、血液/呼氣分配比率個體差異）
品質管制作為
定期校正：每六個月送交標準檢驗局或認可實驗室校正
日常檢查：每日使用前進行空白測試，定期使用標準氣體檢查
維護保養：定期清潔和維護儀器，更換老化組件
操作標準化：制定詳細標準操作程序，對人員進行培訓
品質保證：參加能力驗證計劃，保存完整記錄
射擊殘跡於刑案偵辦上是重要的鑑識證據之一，近年來為避免重金屬污染，許多武器彈藥製造商生產無鉛底火或無毒底火子彈。現行主流分析無機射擊殘跡的分析方法將受到挑戰。因此，轉向有機射擊殘跡的研究成為重要的突破發展。請回答下列問題： (一)有機射擊殘跡主要從發射火藥而來，請說明現今使用的無煙火藥常見的組成成分和添加劑的成分與功能。（10 分） (二)針對有機射擊殘跡的檢驗方法應先考慮以非破壞性的方式檢測。顯微拉曼光譜法則是相對非破壞性的檢驗方法。請說明拉曼光譜儀的基本原理和拉曼光譜儀基本構造，以及如何判定無煙火藥主要成分之不同。（15 分）
1
無煙火藥的組成成分
無煙火藥主要分為三類：
單基火藥：主要成分為硝化纖維素（NC），含氮量約13.35-13.45%
雙基火藥：由硝化纖維素和硝化甘油（NG）組成，NG含量通常為10-40%
三基火藥：由硝化纖維素、硝化甘油和硝基胍組成，硝基胍含量約為45-50%
無煙火藥的添加劑及功能
常見添加劑及其功能：
穩定劑：二苯胺（DPA）、中心對苯二甲酸二乙酯等，防止分解
增塑劑：鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）等，改善可塑性和低溫性能
燃燒調節劑：2,4-二硝基甲苯（DNT）等，調節燃燒速率
閃光抑制劑：硝酸鉀等，減少射擊閃光
潤滑劑：石墨、蠟，改善流動性及防止粘結
拉曼光譜儀的基本原理
拉曼光譜法基於拉曼散射效應：
單色光照射樣品，大部分光子發生彈性散射（瑞利散射）
少部分光子發生非彈性散射（拉曼散射），頻率發生變化
頻率變化對應分子振動能級變化，反映分子結構信息
不同分子結構產生不同的拉曼光譜，可作為分子"指紋"用於鑑別
4
拉曼光譜儀的基本構造
基本構造包括：
激光光源：提供單色激發光
光學系統：聚焦元件、收集散射光、濾除瑞利散射光
光譜儀：分離不同波長的散射光
檢測器：如電荷耦合器件（CCD）
顯微系統：定位和觀察微小樣品
數據處理系統：分析光譜數據
5
判定無煙火藥主要成分之方法
使用拉曼光譜識別方法：
特徵峰識別：硝化纖維素約1280 cm⁻¹，硝化甘油約1290 cm⁻¹
添加劑識別：如二苯胺約1590 cm⁻¹，中心對苯二甲酸二乙酯約1720 cm⁻¹
火藥類型判定：單基火藥僅有硝化纖維素特徵峰；雙基火藥同時具有硝化纖維素和硝化甘油特徵峰；三基火藥還具有硝基胍特徵峰
試敘述有關酵素結合免疫吸附分析法（Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）： (二)並依照樣品及抗原抗體鍵結機制，依 ELISA 原理作用，解釋下列反應 設計方法中，如何定量酵素蛋白質的含量作用機轉： 1.間接法（Indirect）。（6 分） 2.三明治法（Sandwich）。（6 分） 3.競爭法（Competitive）。（6 分）
間接法（Indirect ELISA）
間接法ELISA的定量酵素蛋白質含量作用機轉如下：
抗原固定：將待測抗原直接吸附在微孔板上
初級抗體結合：加入特異性初級抗體與固定的抗原結合
次級抗體結合：加入酵素標記的次級抗體，識別初級抗體
酵素反應：加入底物，產生顏色變化或熒光信號
信號檢測：測量信號強度，與目標蛋白質濃度成正比
定量分析：通過標準曲線計算蛋白質濃度
特點：利用次級抗體放大信號提高靈敏度，但可能增加背景信號。
三明治法（Sandwich ELISA）
三明治法ELISA的定量酵素蛋白質含量作用機轉如下：
捕獲抗體固定：將特異性捕獲抗體吸附在固相載體上
抗原結合：樣品中目標蛋白質被捕獲抗體特異性結合
檢測抗體結合：加入酵素標記的檢測抗體，識別目標蛋白質的不同表位
形成"三明治"結構：捕獲抗體-目標蛋白質-檢測抗體複合物
酵素反應：底物產生顏色變化或熒光信號
信號檢測：信號強度與目標蛋白質濃度成正比
特點：高度特異性和高靈敏度，適用於複雜樣品中的蛋白質檢測。
競爭法（Competitive ELISA）
競爭法ELISA的定量酵素蛋白質含量作用機轉如下：
抗體或抗原固定：將特異性抗體或已知量的抗原吸附在固相載體
競爭反應：
抗體固定型：樣品中目標蛋白質與酵素標記抗原競爭結合
抗原固定型：樣品中目標蛋白質與固定抗原競爭結合標記抗體
洗滌、酵素反應與信號檢測
定量分析：信號強度與樣品中目標蛋白質濃度成反比
特點：適用於小分子抗原或單一抗原表位檢測，高濃度樣品中準確性高。
酵素結合免疫吸附分析法（ELISA）定量酵素蛋白質的含量作用機轉
間接法（Indirect ELISA）作用機轉
抗原吸附：將待測抗原直接吸附在微孔板表面
初級抗體結合：加入特異性識別目標抗原的初級抗體
次級抗體結合：加入酵素標記的次級抗體，識別初級抗體
底物反應：加入酵素底物，產生顏色變化
信號檢測：測量吸光度，信號強度與抗原濃度成正比
特點：信號放大效果好，靈活性高，但可能有較高背景信號。
三明治法（Sandwich ELISA）作用機轉
捕獲抗體吸附：將特異性抗體吸附在微孔板表面
抗原結合：加入含目標蛋白質的樣品，被捕獲抗體特異性捕獲
檢測抗體結合：加入酵素標記的檢測抗體，識別目標蛋白不同表位
底物反應與檢測：加入底物產生顏色，信號強度與蛋白濃度成正比
特點：高度特異性和靈敏度，適用於複雜樣品，但需要兩種不同抗體。
競爭法（Competitive ELISA）作用機轉
抗體/抗原吸附：將特異性抗體或已知量抗原吸附在微孔板表面
競爭反應：樣品中抗原與已知量標記抗原競爭結合固定抗體，或與固定抗原競爭結合標記抗體
洗滌與底物反應：洗去未結合組分，加入底物產生顏色
信號檢測：測量吸光度，信號強度與樣品中目標蛋白質濃度成反比
特點：適用於小分子抗原檢測，只需一種抗體或抗原表位，高濃度樣品中準確性高。